中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測(cè)ELISA試劑盒

概要

嘔吐毒素也稱(chēng)為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON），是由串珠鐮刀菌、輪狀鐮刀菌以及多育鐮刀菌等產(chǎn)生的真菌毒素，大多存在于糧谷、飼料及其制品中。中毒后影響消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)，主要表現(xiàn)為嘔吐、頭痛、頭暈、腹痛、腹瀉等癥狀。我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：玉米、大麥、小麥及其制品中嘔吐毒素不得超過(guò)1mg/kg，豬、犢牛、泌乳期動(dòng)物配合飼料中嘔吐毒素不得超過(guò)1mg/kg，牛、家禽配合飼料中嘔吐毒素不得超過(guò)5mg/kg。

原理

測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素（DON）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)抗原和抗體后，游離的嘔吐毒素與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合，沒(méi)有結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍(lán)色，加入終止液后顏色由藍(lán)變黃，用酶標(biāo)儀在450nm處檢測(cè)，吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較即可得出嘔吐毒素的含量。

1. 試劑盒的組成

1. 包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12 條×8 孔）

2. DON標(biāo)準(zhǔn)品：0ng/mL 、10ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、250ng/mL 1 瓶 × 1.0mL

3. DON抗體：              1 瓶 × 10mL

4. DON酶標(biāo)抗原：           1 瓶 × 10mL

5. 10× 濃縮洗滌液：         1 瓶 × 50mL

6. DON稀釋緩沖液A：        1 瓶 × 50mL

7. DON稀釋緩沖液B：        1 瓶 × 50mL

8. 顯色底物TMB：           1 瓶 × 17mL

9. 終止液：                 1 瓶 × 7mL

10. 試劑盒說(shuō)明書(shū)：           1份

11. 質(zhì)檢報(bào)告：               1份

1. 需要的儀器、試劑

1. 儀器

1. 酶標(biāo)儀 450nm（iELisa全自動(dòng)酶標(biāo)儀或相當(dāng)者）

2. 微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道

3. 多功能旋轉(zhuǎn)混合器（或者搖床、高速均質(zhì)器）

4. 酶標(biāo)板振蕩器

5. 渦旋混合器

6. 離心機(jī)

7. 50mL離心管

8. 1.5mL離心管

9. 定性濾紙

10. 過(guò)濾漏斗

11. 天平：感量0.01g

1. 試劑

1. 純水（蒸餾水、去離子水）

適用樣品：谷物（玉米、小麥、大麥、大米、大豆），飼料（高靈敏度），飼料，發(fā)酵液，尿液樣品。

注意事項(xiàng)

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。

2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不成線(xiàn)性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3. 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線(xiàn)下。

4. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。

6. 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。

7. 試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃，切勿冷凍。

中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測(cè)ELISA試劑盒

性能指標(biāo)

1. 檢測(cè)限LOD: 谷物0.15ppm（mg/kg），飼料0.25ppm（mg/kg），發(fā)酵液0.15ppm（mg/kg）,尿液0.05ppm（mg/kg）。（LOD：空白樣品測(cè)定值+2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差SD）

2. 定量限LOQ: 谷物0.25ppm（mg/kg），飼料0.5ppm（mg/kg），發(fā)酵液0.25ppm（mg/kg）,尿液0.1ppm（mg/kg）。

3. 定量檢測(cè)范圍：谷物0.25-6.0ppm，飼料0.5-12.0ppm，發(fā)酵液0.25-6.0ppm,尿液0.1-1.0ppm。